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莲雾实时荧光定量PCR内参基因的筛选和验证

2020-01-30 06:00 莲雾

【摘要】:【目的】莲雾果实品质不稳定和冬季超低温寒害是出产上的两大问题,筛选稳定靠谱的内参基因,以便开展莲雾品质形成和超低温胁迫响应分子机制研究。【法子】以‘紫红’‘黑珍珠’‘翡翠’3个莲雾品种为材料,利用qRT-PCR检测7个候选内参基因ACT-7、GAPDH、UBQ、α-TUB、CYP20-1、EF-2和APRT-5在果实发育和超低温胁迫时的解释程度,通过geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder软件发起基因稳定性评价。【结果】不同样软件剖析结果不同样,geNorm、NormFinder和RefFinder结果相似,果肉发育全历程、果皮发育全历程、超低温胁迫下解释最稳定的内参基因分別是ACT-7、α-TUB和CYP20-1,BestKeeper则显示UBQ为解释最稳定的基因。用筛选的内参基因α-TUB和UBQ剖析莲雾花青苷合成途径中F3H基因的解释,2者解释法则较一致。【依据】莲雾果肉发育全历程、果皮发育全历程、超低温胁迫下最适的内参基因数分別为4个(ACT-7、GAPDH、UBQ、α-TUB)、2个(α-TUB、UBQ)和2个(CYP20-1、UBQ)。

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